量程的調(diào)節(jié)
在我們的日常檢測中,有很多小的儀器看似不太重要,卻是萬萬離不得的,比如移液槍。無論是提取核酸,還是后續(xù)加樣上機,移液槍就像是我們在微觀世界的一雙手,幫我們一次又一次完成真正的手沒法直接完成的操作。正確的使用移液槍能保證實驗操作的準(zhǔn)確性,而用心的保護移液槍就像是在保護我們的手。在調(diào)節(jié)量程時,如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時,則可先順時針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的精度。
在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內(nèi)部機械裝置而損壞了移液槍。
槍頭(吸液嘴)的裝配
在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這時錯誤的做法,因為這樣會導(dǎo)致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的第/一道對準(zhǔn)第/一個槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。
一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第/一停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至第/一停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。后松開按鈕。
二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第/一停點排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于第/一停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。
移液器的正確放置
使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
維護保養(yǎng)時的注意事項
如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。
定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60 %的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾干。
高溫消毒之前,要確保移液器能適應(yīng)高溫。
校準(zhǔn)是可以在20-25度環(huán)境中,通過重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來進行。
使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下幾方面:
1、槍頭是否匹配;
2、彈簧活塞是否正常;
3、如果是易揮發(fā)的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題??梢韵任艓状我后w,然后再移液。
移液器的選購應(yīng)當(dāng)考慮以下幾個方面的問題
1.高質(zhì)量的性能
2. *的體積控制系統(tǒng)
3.一致的準(zhǔn)確度和重復(fù)性
4.可靠耐用
5.人體工程學(xué)設(shè)計
如果一支移液器能夠同時具備可變?nèi)萘炕蛘吖潭ㄈ萘?,那就意味著在一把移液器中同時具備一個可變量程活塞和一個固定量程活塞。這意味著該品牌移液器在單支移液器的價格水平上為用戶提供了兩種功能。有的品牌的移液器的功能還不僅限于此,不僅每支移液器帶有固定容量活塞,而且您還可以購買其它量程的固定活塞安裝于移液器上,其價格遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于購買一支固定量程移液器的價格。采用這個方法,您可以根據(jù)自己的需要選購固定量程移液器,經(jīng)濟且方便。
移液器與Tip頭的結(jié)合能力是否合適
移液器與Tip頭的結(jié)合能力是精/確/度和重現(xiàn)性的保證,一般來說移液器和Tip的結(jié)合都是采用直接卡口的形式,這種方法比較的牢固,但是在更換Tip頭時需要比較使勁,久之對于移液器與Tip頭的結(jié)合會產(chǎn)生不良的影響,有很大的可能會影響取樣精/度。有些品牌的移液器具備雙層O型圈,這樣可以保證加樣時的誤差小于設(shè)定誤差的1%。O型密封圈使得結(jié)合更加精/密,從而減小了不精/確的誤差。這種移液器大家在選購時,不妨做個參考,因為這種移液器能夠適合更多的Tip頭。
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