瓊脂糖凝膠電泳上樣量,一般取決于瓊脂糖凝膠的大小和濃度,以及DNA的濃度和純度等因素。通常而言,瓊脂糖凝膠電泳的上樣量應(yīng)該在0.1至1.0 μg之間。
如果上樣量太低,DNA條帶可能會(huì)過(guò)于模糊且難以讀取,無(wú)法得出準(zhǔn)確的結(jié)果;而如果上樣量太高,則會(huì)使得DNA條帶過(guò)于密集而無(wú)法區(qū)分,也會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,確定適當(dāng)?shù)纳蠘恿渴沁M(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵因素之一。
下面是一些常見的上樣量推薦:
1. 載體DNA:10 ng至1 μg
2. PCR產(chǎn)物:10 ng至1 μg
3. 高分子DNA:約50-100 ng
4. 短DNA片段:1 ng至50 ng
5. 細(xì)菌基因組DNA:100 ng至1 μg
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